L’ambito territoriale dell'Azienda coincide con quello della Provincia di Trapani. Comprende un territorio suddiviso in 24 comuni con una popolazione residente di 435.957 abitanti censita al 01/10/2009, oltre gli immigrati temporaneamente presenti, distribuiti in 2460 Kmq di superficie, isole comprese.
L’Azienda è articolata territorialmente in Distretti Sanitari, ai sensi della L. R. n. 30/93, e successive modifiche ed integrazioni e della Legge Regionale n. 5/2009.  
Il territorio provinciale è suddiviso nei seguenti sei Distretti Sanitari:  

    -Distretto di Trapani, comprendente i Comuni di Trapani, Favignana, Paceco, Erice, Valderice, Buseto Palizzolo, Custonaci , San Vito Lo Capo.
    -Distretto di Marsala, comprendente i Comuni di Marsala e Petrosino.  
    -Distretto di Mazara del Vallo, comprendente i Comuni di Mazara del Vallo, Salemi, Vita e Gibellina.  
    -Distretto di Castelvetrano, comprendente i Comuni di Castelvetrano, Partanna, Santa Ninfa, Campobello di Mazara, Salaparuta e Poggioreale.  
    -Distretto di Alcamo, comprendente i Comuni di Alcamo, Castellammare del Golfo e Calatafimi- Segesta.  
    -Distretto di Pantelleria, comprende il Comune di Pantelleria.

Nell’ambito del medesimo territorio provinciale insistono i seguenti Distretti  Ospedalieri, costituiti dall’aggregazione dei presidi ospedalieri come di seguito individuati:

    -Distretto Ospedaliero TP;
    -Presidio Ospedaliero di Trapani;
    -Presidio Ospedaliero di Alcamo;
    -Presidio Ospedaliero di Pantelleria;
    -Distretto Ospedaliero TP;
    -Presidio Ospedaliero di Marsala;
    -Presidio Ospedaliero di Mazara del Vallo;
    -Presidio Ospedaliero di Castelvetrano;
    -Presidio Ospedaliero di Salemi.